細(xì)胞培養(yǎng)步驟包括以下三個(gè)主要環(huán)節(jié)：預(yù)培養(yǎng)、傳代和凍存。

預(yù)培養(yǎng)：首先將細(xì)胞移到含有細(xì)胞培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿中，盡可能地使其接觸到培養(yǎng)基。

然后在一個(gè)恒溫、濕度適宜的環(huán)境中培養(yǎng)，為細(xì)胞取得更好的生長(zhǎng)條件。

傳代：當(dāng)細(xì)胞密度達(dá)到一定程度時(shí)，需要將細(xì)胞分離并進(jìn)行傳代。

將細(xì)胞培養(yǎng)液倒出，以PBS、EDTA或胰酶等方法使細(xì)胞脫離基質(zhì)，然后進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)，根據(jù)所需細(xì)胞數(shù)將細(xì)胞分裝到新的培養(yǎng)皿中。

凍存：通過低溫保存，以便在以后使用。

需要選擇適合細(xì)胞保存的凍存液，并嚴(yán)格控制溫度。

在加入凍存液之前，必須將無菌液體避免氣泡出現(xiàn)，以免液體溫度波動(dòng)影響細(xì)胞的生存。